一种半仿生酶超声波法提取禹州漏芦总黄酮工艺及步骤

禹州漏芦为菊科蓝刺头属植物蓝刺头及华东蓝刺头的干燥根，具有清热解毒、排脓止血、消痈下乳的功效，为《中华人民共和国药典》(后称药典)收载品种。此前，禹州漏芦曾与祁州漏芦一起作为漏芦收载于药典中。近年的研究证明两者的化学成分及疗效差异较大，因此药典1995年版将祁州漏芦称漏芦，禹州漏芦另列作为独立中药品种。禹州漏芦一般用于治疗疮痈脓肿、皮肤热毒和乳汁不通等症。已从禹州漏芦中分离鉴定了噻吩类、挥发油类、三萜类、甾体类、芳香类、有机酸类及酯类、糖类等大量化合物并筛选到相应的活性部位，这些化合物具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗脂质过氧化、抗HIV、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老以及护肝、免疫调节及抗炎作用等。近年来研究表明禹州漏芦的抗类风湿性关节炎作用主要与其总黄酮具有抑制关节炎的Wnt信号作用有关。黄酮类化合物是广泛存在于药用植物中的一类化合物，大多与糖类结合为苷存在，多具有调血脂、扩张冠脉、止血、镇咳、祛痰、降低血管脆性等活性。银杏、红花、黄芩、陈皮等常用中药中都含有此类成分。此外，黄酮类化合物具有多种多样的生物学功能，如调节植物生长、保护植物免受紫外线的损伤以及作为植物抗毒素和活性氧清除剂等。目前药用植物黄酮类化合物的研究主要集中在提取工艺、成分分析及药理作用方面。随着分子生物学的迅速发展，分子生物学也开始涉及到药用植物有效成分的生物合成及调控机制的研究，并取得了较大进展。总黄酮作为禹州漏芦中一种主要成分，它的分离、结构鉴定、有效成分提取、纯化及药理作用研究相对较少。为了更好的开发其药用价值，生产上尝试使用酶解法、半仿生法、超声波法等传统提取黄酮类物质的方法对禹州漏芦中黄酮类化合物进行提取，但是都存在一定的缺陷。

华炬科技新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项一种半仿生酶超声波法提取禹州漏芦总黄酮工艺及步骤，该技术的有益效果：第一、半仿生提取法是近几年提出的新方法。它是从生物药剂学的角度，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服药物经胃肠道转运吸收的环境，采用活性指导下的导向分离方法，具有有效成分损失少、成本低、生产周期短的特点。在操作中，根据仿生学原理，人体胃、小肠、大肠的体液酸度最佳pH分别为2.0，7.5和8.3，先将原料用一定pH的酸水提取，继以一定pH的碱水提取，提取液分别过滤、浓缩；第二、对于一些黄酮类化合物被细胞壁包围不易提取的原料，传统的热水、碱、有机溶剂提取法，受细胞壁主要成分纤维素的阻碍，往往提取效率较低。恰当地利用酶处理这些植物材料，可改变细胞壁的通透性，提高有效成分的提取率。根据传质理论，溶剂向固体表面扩散，渗透固体表面，进入固体内部及固体内部微孔隙内，溶解黄酮类化合物，通过固体微孔隙向固体表面扩散，在表面与溶剂主体间，由于浓度差作用力，黄酮类化合物向溶剂主体扩散，完成提取传质过程。采用酶解法却能使细胞壁疏松、破裂，减小传质阻力，从而提高提取效率；第三、用超声波提取黄酮类物质，是目前比较新的方法。原理是利用超声波所具有的空化作用破坏植物的细胞壁，从而有助于黄酮类物质快速溶解于溶剂中。同时，利用超声波的机械效应促使提取溶剂不断震荡有助于溶质扩散，超声波的热效应对原料还具有水浴作用。另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等，使其加速被提取成分的扩散、释放。超声波提取法具有设备简单，操作方便，提取时间短，产率高，无需加热，同时有利于保护热不稳定成分，省时，节能，提取率高的优点；综上所述，所述的一种半仿生酶辅助超声波法提取禹州漏芦总黄酮的工艺，以禹州漏芦为原料，经过一系列工序提取禹州漏芦总黄酮，在模拟人体胃、小肠、大肠的体液酸度环境下能够最大限度的保留总黄酮的有效成分，同时超声波叠加酶解细胞壁的处理方式最大限度地溶出总黄酮，节约有机溶剂和酶的量有助于减少环境污染，并结合ODS开放柱、中压柱分离纯化技术，提高总黄酮中有效成分提取产率，现将该一种半仿生酶超声波法提取禹州漏芦总黄酮工艺及步骤及技术方案及实施例介绍如下供研究交流参考：（441321  631512）